Techniques de séparation et d'analyse en biochimie. Critères
Les techniques de séparation en Biochimie exploitent les propriétés physico-chimiques des molécules. L'électrophorèse fait appel essentiellement au caractère de l'ionicité des molécules qui est derrière l'apparition de charges électrique. La taille des molécules interfère avec la charge dans le processus de séparation.
La chromatographie est basée sur l'exploit des propriétés de la polarité,
ionicité, taille et la forme des molécules.. Takween; Supports pédagogiques
Les propriétés suivantes sont utilisées pour définir les différents types de téchniques de séparation:
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caractère moléculaire
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Propriété
physico-chimique
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Techniques de séparation appropriée
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| Polarité | - Volatilité | Chromatographie Gaz-Liquide |
| - Solubilité | Chromatographie Liquide-Liquide | |
| - Adsorption | Chromatographie Solide-Liquide | |
| Ionicité | - Charge électrique | Chromatographie d'Echange d'Ions |
| Electrophorèse | ||
| Taille | - Diffusion | - chromatographie d'exclusion ou perméation (gel exclusion chromatography, كروماتوغرافيا الإقصاء، كروماتوغرافيا التغلغل - |
| Dialyse | ||
| Forme | - sedimentation | Ultracentifugation |
| - Fixation de ligands | Chromatographie d'Affinité |
Techniques d'électrophorèse
Lien:
- électrophorèse. Théorie et pratique
- électrophorèse des albumines et globulines sériques
- électrophorèse de l'ADN. QCM
Electrophorèse des isoenzymes. Liens:
- Isoenzymes. Eflet des mutations
- "Isoenzymes. Principe de détection
- Isoenzymes. Loci et allèles
- Isoenzymes hétéromériques
Electrophorèse des acides nucléiques et marquage moléculaire. Liens:
- RFLP
- RAPD
- AFLP
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Travaux dirigés
Lien: Travaux dirigés
Travaux pratiques. Liens:
- Travail pratique sur les isoenzymes du palmier dattier
- Purification et Electrophorèse de l'ADN (TP S4)
- Rôle des composantes des étapes d'extraction et de purification
de l'ADN
Tests et exercices. Liens:
- électrophorèse: QCM
- Techniques: exercices
Téléchargements:
- تقنيات العزل و التحليل في البيوكيمياء Techniques d'analyse (Ar)
- تقنية الكهرتهجير Electrophorèse (Ar)
Techniques de chromatographie
Le terme 'chromatographie' ('chromatography', en anglais) vient du Grec 'Khrôma' = couleur et 'Graphein' = écrire) implique une serie de techniques reliées par un principe commun: la migration différentielle des substances à séparer à travers une phase solide poreuse (phase fixe), sous l'impulsion d'un fluides vecteur (phase mobile). Plusieurs variantes de cette technique peuvent se présenter. Elles reposent toutes sur 3 grands principes:
1/ Principe d'adsorption. La phase fixe joue le rôle principal:
- Chromatographie d'adsorption
2/ Principe de partage. Les 2 phases (Fixe et mobile) sont impliquées. La phase fixe est constituée d'une matière: Chromatographie de partage
2.1. Faite de sa propre structure: Chromatographie sur papier
2.2. Déposée sur une plaque:Chromatographie sur couche mince
2.3. Contenue dans une colonne: Chromatographie sur colonne.
3/ Principe d'échange. La phase fixe présente une forme de réactivité avec les substances à séparer.
3.1. Chromato d'échange d'ions
3.2. Chromato d'exclusion
3.3. Chromato d'affinité
Le vecteur est sous forme liquide: Chromatographie en phase liquide
Le vecteur est sous forme gazeuse: Chromatographie en phase gazeuse
