Electrophorèse (كهرتهجير, electrophoresis), tampons. QCM

Eléctrophorèse, Electrophoresis, كهرتهجير. Importance des tampons (QCM)

L'électrophorèse ( Electrophoresis, كهرتهجير)est l'une des techniques de séparation et d'analyse utilisées en biochimie. Elle permet de séparer sur un support précis des molécules variées, comme les protéines et les acides nucléiques. Les tampons utilisés revêtent une grande importance
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QUESTION 1 . L'électrophorèse est une technique de séparation qui exploite les critères moléculaires suivants - cocher la réponse juste -
(Taille et charge électrique et la forme, parfois)(!Solubilité des molécules)(!Taille et polarité des molécules)(! Forme des molécules)(!Forme et solubilitédes molécules)

QUESTION 2 . En électrophorèse, les protéines basiques comme les histones sont mieux séparées à pH acide -cocher la réponse juste
(Vrai)(!Faux)

QUESTION 3 . En électrophorèse, les protéines acides sont mieux séparées à pH acide -cocher la réponse juste-
(!Vrai)(Faux)

QUESTION 4 . Lors de l'électrophorèse, la diffusion des molécules à partir du gel d'électrophorèse est favorisée par: -cocher la réponse juste-
(Une migration lente)(!Une migration rapide)

QUESTION 5 . Le chauffage induit par l'électrophorèse est favorisé par: -cocher la réponse juste-
(!Force ionique faible)(Force ionique élevée)

QUESTION 6 . La résolution des bandes (bandes fines) en électrophorèse est favorisée par: -cocher la réponse juste-
(!Force ionique faible)(Force ionique élevée)

QUESTION 7 . En électrophorèse, une migration rapide avec un chauffage faible et des bandes moins résolues est due à: -cocher la réponse juste-
(Utilisation de tampons à faible force ionique)(!Utilisation de tampons à forte force ionique)

QUESTION 8 . En électrophorèse, une migration lente avec un chauffage élevé et des bandes plus résolues est due à: -cocher la réponse juste-
(!Utilisation de tampons à faible force ionique)(Utilisation de tampons à forte force ionique)

QUESTION 9 . Le système d'électrophorèse chauffe. Que dois je faire ? -cocher la réponse juste-
(Je diminue la force ionique des tampons au dépend de la netteté des bandes)(!J'augmente la force ionique des tampons au dépend d'une mobilité faible des molécules à séparer)

QUESTION 10 . Les gels d'électrophorèse à résolution élevée sont: -cocher la réponse juste-
(!Gels d'agarose)(Gels de polyacrylamide)(!Gels d'amidon)

QUESTION 11 . Effet de l'immersion des gels d'agarose dans le tampon sur l'électrophorèse horizontale de l'ADN. Par rapport à un gel immergé 3 mm dessus par le tampon, une électrophorèse sur gel immergé 10 mm dessus conduit aux effets suivants: -cocher la réponse juste-
(Vitesse de migration lente, car la résistance du circuit diminue, intensité passante élevée, chauffage élevé et distorsion des bandes)(!Migration rapide, car la résistance du circuit augmente, intensité passante faible. Absence de chauffage et sans distorsion des bandes)

QUESTION 12 . Est-il possible de réutiliser plusieurs fois le tampon de migration lors d'une électrophorèse?: -cocher la réponse juste-
(!Oui, car les tampons les tampons d'électrophorèse s'épuisent rarement, s'ils sont conservés à +4°C. Ils n'ont pas besoin de recyclage dans ces conditions. Les molécules sont résolues en bandes très fines)(Non, car les tampons s'épuisent avec des vitesses différentes. En cas d'épuisement, le gel surchauffe et l'ADN donne des traînées=smears)

Réponses. Détails

Explication question 1 : L'ELECTROPHORESE EXPOITE AVANT TOUT LA CHARGE ELECTRIQUE PUIS LA TAILLE.
Explication question 2 : A pH ACIDE LES PROTEINES BASIQUES SERONT CHARGEES '+'. LES pH BASIQUES COURANTS (8,8) NE CONVIENNENT PAS.
Les PI de la plupart des protéines se situent entre pH 4,0 et 7,0. Donc, les tampons à pH compris entre 8 et 9,5 sont souvent utilisés lors de l'électrophorèse des protéines.
Explication question 3 : LES PROTEINES ACIDES SONT MIEUX SEPAREES A pH BASIQUE.
Explication question 4 : UNE MIGRATION LENTE FAVORISE LA DIFFUSION DES MOLECULES.
Explication question 5 : UNE FORCE IONIQUE ELEVEE (ex forte concentration en sels) PROVOQUE DU CHAUFFAGE !
- Effet du mode de séparation 'voltage (V) constant' ou 'Intensité (I) constante':
- Séparation à V constant: Si R augmente, I diminuera (car V = Rx I). Ceci entraîne dinimution du chauffage (lié à la puissance (P); P = I x I x R).
- Séparation à I constante: la mobilité reste constante. Si R augmente, le chauffage augmentera (P augmente)
Explication question 6 : UNE FORCE IONIQUE ELEVEE DONNE DES BANDES PLUS FINES !
Explication question 7 : CECI EST OBTENU AVEC DES TAMPONS A FAIBLE FORCE IONIQUE !
Explication question 8 : CECI EST OBTENU AVEC DES TAMPONS A FORTE FORCE IONIQUE !
Explication question 9 : DIMINUER LA FORCE IONIQUE !

Réponses 7, 8, 9: l'augmentation de la force ionique favorise l'association des ions du tampon avec les groupements chargés des molécules à séparer (ex protéines). Il en résulte un passage intense du courant dans le support accompagné d'une diminution de la mobilité des protéines (entrainement rapide par le courant appliqué sur des molécules à séparer moins mobiles). Ceci conduit à: 1/ bandes minces pour les molécules à séparer (tassement) et 2/ Augmentation du chauffage, considérant l'intensité élevée du courant électrique traversant le support de migration.

Explication question 10 : CE SONT LES GELS DE POLYACRYLAMIDE !
Explication question 11 : LE GEL IMMERGE A 10 MM LAISSE PASSER PLUS DE COURANT ENTRAINANT LE CHAUFFAGE ET RALENTISSANT LA MIGRATION DU FAIT D'UNE POSSEE FAIBLE SUR LES MOLECULES A SEPARER
Explication question 12 : LES TAMPONS S'EPUISENT RAPIDEMENT SAUF S'ILS SONT RECYCLES PAR CIRCULATION ENTRE LES ELECTRODES