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Techniques de séparation et d'analyse en biochimie


Les méthodes de séparation en Biochimie exploitent les propriétés physico-chimiques des molécules. L'électrophorèse fait appel essentiellement au caractère de l'ionicité des molécules qui est derrière l'apparition de charges électrique. La taille des molécules interfère avec la charge dans le processus de séparation.

La chromatographie est basée sur l'exploit des propriétés de la polarité, ionicité, taille et la forme des molécules..Takween; Supports pédagogiques


technique d'electrophorese

Les propriétés suivantes sont utilisées pour définir les différents types de téchniques de séparation:
caractère moléculaire
Propriété physico-chimique
Techniques de séparation appropriée
Polarité - Volatilité Chromatographie Gaz-Liquide
- Solubilité Chromatographie Liquide-Liquide
- Adsorption Chromatographie Solide-Liquide
Ionicité - Charge électrique Chromatographie d'Echange d'Ions
Electrophorèse
Taille - Diffusion -- chromatographie d'exclusion ou perméation (gel exclusion chromatography, كروماتوغرافيا الإقصاء، كروماتوغرافيا التغلغل --
Dialyse
Forme - sedimentation Ultracentifugation
- Fixation de ligands Chromatographie d'Affinité

Techniques par vidéos




2. Techniques d'électrophorèse

- Lien: électrophorèse. Théorie et pratique

3. Electrophorèse des isoenzymes

Liens:
- Isoenzymes. Eflet des mutations
- Isoenzymes. Principe de détection
- Isoenzymes. Loci et allèles
- Isoenzymes hétéromériques

4. Electrophorèse des acides nucléiques et marquage moléculaire

liens: - RFLP - RAPD - AFLP

5. Phylogénie moléculaire

6. Travaux dirigés

Lien: Travaux dirigés


7. Travaux pratiques

Biochimie. Travaux pratiques (TP)

Liens: - Travail pratique sur les isoenzymes du palmier dattier

- Purification et Electrophorèse de l'ADN (TP S4)

- Rôle des composantes des étapes d'extraction et de purification de l'ADN

8. Tests et exercices

- électrophorèse: QCM
- Techniques: exercices

9. Téléchargements

- تقنيات العزل و التحليل في البيوكيمياء Techniques d'analyse (Ar)

- تقنية الكهرتهجير Electrophorèse (Ar)


Techniques de chromatographie
Le terme 'chromatographie' ('chromatography', en anglais) vient du Grec 'Khrôma' = couleur et 'Graphein' = écrire) implique une serie de techniques reliées par un principe commun: la migration différentielle des substances à séparer à travers une phase solide poreuse (phase fixe), sous l'impulsion d'un fluides vecteur (phase mobile). Plusieurs variantes de cette technique peuvent se présenter. Elles reposent toutes sur 3 grands principes:

1/ Principe d'adsorption. La phase fixe joue le rôle principal: Chromatographie d'adsorption

2/ Principe de partage. Les 2 phases (Fixe et mobile) sont impliquées. La phase fixe est constituée d'une matière: Chromatographie de partage

2.1. Faite de sa propre structure: Chromatographie sur papier
2.2. Déposée sur une plaque:Chromatographie sur couche mince
2.3. Contenue dans une colonne: Chromatographie sur colonne



3/ Principe d'échange. La phase fixe présente une forme de réactivité avec les substances àséparer.
3.1. Chromatographie d'échange d'ions
3.2. Chromatographie d'exclusion
3.3. Chromatographie d'affinité


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