biochimie. Cous, techniques d'analyse et applications en biotechnologies
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Techniques de séparation et d'analyse en biochimie

1. Techniques de séparation classées selon les propriétés des molécules

Les méthodes de séparation en Biochimie exploitent les propriétés physico-chimiques des molécules. L'électrophorèse fait appel essentiellement au caractère de l'ionicité des molécules qui est derrière l'apparition de charges électrique. La taille des molécules interfère avec la charge dans le processus de séparation.

La chromatographie est basée sur l'exploit des propriétés de la polarité, ionicité, taille et la forme des molécules..Takween; Supports pédagogiques ....


technique d'electrophorese

Les propriétés suivantes sont utilisées pour définir les différents types de téchniques de séparation:

caractère moléculaire
Propriété physico-chimique
Techniques de séparation appropriée
Polarité - Volatilité Chromatographie Gaz-Liquide
- Solubilité Chromatographie Liquide-Liquide
-Adsorption Chromatographie Solide-Liquide
Ionicité - Charge électrique Chromatographie d'Echange d'Ions
Electrophorèse
Taille - Diffusion Chromatographie d'exclusion (gel permeation)
Dialyse
Forme - sedimentation Ultracentifugation
- Fixation de ligands Chromatographie d'Affinité

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sciences naturelles, matériaux biologiques de base

 

2. Techniques d'électrophorèse

- LIEN: électrophorèse. Théorie et pratique

3. Electrophorèse des isoenzymes

Liens:
- Isoenzymes. Eflet des mutations
- Isoenzymes. Principe de détection
- Isoenzymes. Loci et allèles
- Isoenzymes hétéromériques

4. Electrophorèse des acides nucléiques et marquage moléculaire

liens: - RFLP - RAPD - AFLP

5. Travaux pratiques

Liens: - Travail pratique sur les isoenzymes du palmier dattier

6. Travaux dirigés

Lien: Travaux dirigés

7. Tests et exercices

- électrophorèse: QCM
- Techniques: exercices

3. Techniques de chromatographie

Le terme 'chromatographie' ('chromatography', en anglais) vient du Grec 'Khrôma' = couleur et 'Graphein' = écrire) implique une serie de techniques reliées par un principe commun: la migration différentielle des substances à séparer à travers une phase solide poreuse (phase fixe), sous l'impulsion d'un fluides vecteur (phase mobile). Plusieurs variantes de cette technique peuvent se présenter. Elles reposent toutes sur 3 grands principes:

1/ Principe d'adsorption. La phase fixe joue le rôle principal: Chromatographie d'adsorption

2/ Principe de partage. Les 2 phases (Fixe et mobile) sont impliquées. La phase fixe est constituée d'une matière: Chromatographie de partage

2.1. Faite de sa propre structure: Chromatographie sur papier
2.2. Déposée sur une plaque:Chromatographie sur couche mince
2.3. Contenue dans une colonne: Chromatographie sur colonne

3/ Principe d'échange. La phase fixe présente une forme de réactivité avec les substances àséparer.
3.1. Chromatographie d'échange d'ions
3.2. Chromatographie d'exclusion
3.3. Chromatographie d'affinité
Le vecteur est sous forme liquide: Chromatographie en phase liquide
Le vecteur est sous forme gazeuse: Chromatographie en phase gazeuse

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Techniques de séparation-analyse en biochimie. Chromatographie, électrophorèse