Biochimie, biotechnologies

Enzymes, الإنزيمات. Paramètres Km et Vmax et effet des inhibiteurs réversibles. Cas de la phosphatase alcaline

Enzymes, الإنزيمات. Paramètres Km et Vmax et effet des inhibiteurs réversibles. Cas de la phosphatase alcaline


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Enzymes, inhibiteurs إنزيمات، مثبطات Enzymes, Inhibitors

Phosphatase alcaline (Enzyme)


La phosphatase alcaline catalyse l'hydrolyse des esters phosphates en milieu basique. L'étude de cette enzyme pour l'hydrolyse du paranitrophénylphosphate (PNPP) en absence ou en présence de phosphate inorganique (PNPP ---> PNP + P), a permis d'obtenir des vitesses enzymatiques résumées dans le tableau suivant:

  v (µmoles/min)
(PNPP) mM Sans inhibiteur (P): 0,5 mM (P): 1 mM
0,2 1,78 1,32 1,05
0,3 2,18 1,70 1,39
0,4 2,46 1,98 1,66
0,5 2,67 2,21 1,88
0,6 2,82 2,39 2,06
1,0 3,20 2,84 2,56

Déterminer le type d'inhibition exercée par le phosphate vis à vis du PNPP. Calculer la constante d'inhibition


Réponse


Enzymes. Phosphatase alcaline

Km = 0,249 mM pour le substrat PNPP, Vmax = 4 µmoles/min
Effet du phosphate: Inhibition compétitive: Ki = 0,8 mM
Icil'inhibiteur fait augmenter Km d'un facteur (1 + (I)/Ki). Donc KmI = Km.(1 + (I)/Ki). Par contre, Vmax reste inchangée; VmaxI = Vmax.
Plus d'explications sur l'inhibiteur compétitif dans la page 76 du livre 'Sciences de la vie. Protéines et Enzymes' , Baaziz, 2013.


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