Examen de Biologie moléculaire (ADN purification, électrophorèse)

Les travaux pratiques (TP) de Biologie moléculaire, filière sciences de la vie, semestre 5 (S5) concernent la purification de l'ADN des plantes et son analyse par spectrophotométrie et électrophorèse, MODULE de BIOLOGIE MOLECULAIRE. Contrôle de Travaux pratiques, Faculté des Sciences-Semlalia, Université Cadi Ayyad, Marrakech, Maroc. Durée: 45 min

تغطي الأشغال التطبيقية في البيولوجيا الجزيئية، الأسدس الخامس، تنقية الحمض النووي (دنا DNA) للنبات، وتحليله عن طريق القياس الطيفي والكهرتهجير).

ENONCE DE L'EXAMEN DE BIOLOGIE MOLECULAIRE (ADN purification, ADN électrophorèse)

Après électrophorèse du DNA de plasmide sur gel d'agarose 0,8% pendant 1 heure à 100V , un électrophorégramme correspondant à 4 échantillons, a été obtenu:
- Echantillon 1: Marqueurs de PM. La taille est indiquée en paires de bases (pb).
- Echantillon 2: Plasmide X natif (100 ng).
- Echantillon 3: Plasmide X (100 ng) complètement hydrolysé par une enzyme de restriction E1.
- Echantillon 4: Plasmide X (100 ng) complètement hydrolysé par une enzyme de restriction E2.
Les résultats obtenus sont montrés dans les tableaux suivants.
Marqueurs des poids moléculaires:

1/ Tracer la courbe étalon sue le papier semi-log accompagnant le texte (/4 points)
Echantillons 2, 3 et 4:

2/ Déterminer la taille des DNA correspondant à l'échantillon 2. Qu'en déduisez vous ? (/2).
bande 1: ................ - Bande 2: ............... - Déduction: ..............
3/ Déterminer la taille de DNA de l'échantillon 3. Quel est le nombre de coupures effectuées par E1 ? Qu'en déduisez vous ? (/4)
Taille du DNA: ........... - Nombre de coupures: ......... - Déduction: ..............
4/ Peut-on déterminer la taille du plasmide X par l'analyse de ces 2 résultats ? Si oui, donnez sa taille (/2,5)
Oui/Non: ........ - Taille: ...........
5/ Déterminer les tailles des DNA de l'échantillon 4. Quel est le nombre de coupures effectuées par E2 ?. Déduire la taille du plasmide X (/4).
Taille du DNA: bande 1 ........ - bande 2 ........- bande 3 ............
Nombre de coupures: ............ - Taille du plasmide X: ..............
6/ Déterminer les quantités de DNA en ng correspondantes aux 3 fragments de l'échantillon 4. Donner le détail du calcul (/3,5)