SUCRES. ASPECT QUALITATIF. IDENTIFICATION PAR DES REACTIONS: Molish, iode, Fehling, Barfoed, Bial, Seliwanoff
Les
glucides (sucres, سكريات) sont identifiables en TP S3 par des réactions caractéristiques colorée (Molish, Iode, Fehling, Barfoed, Seliwanoff, Bial). L'amidon (amylose + amylopectine) réagit avec l'iode et peut être mis en évidence.
Pour savoir si un aliment contient des glucides simples ou de l'amidon (amylose + amylopectine), un sucre complexe, le test de molish permet, tout d'abord, la mise en évidence d'un sucre (et pas autre chose). Le test à l'iode permet de déterminer si le glucide est de l'amidon et le processus d'identification continue selon la clé suivante où la propriété des sucres à former du furfural est exploitée:
نتطرق هنا للاختبارات المرتكزة على قدرة السكريات الاختزالية و تكوينها لمركبات الفورفورال (Furfural). تعتمد الدراسة على الرسم التالي.
VIDEOS DU TP:
VIDEO Fr:
1. Test de Molish pour la détection de tout ce qui est sucre
إختبار موليش للكشف عن السكريات
الغرض من الاختبار (But du test)
التعرف على مادة سكرية (كربوهيدراتية) وتمييزها عن الدهنيات والبروتينات. و هو اختبار عام لجميع السكريات ) كما يمكن أن يعطي إيجابية مع البروتينات السكرية). سلبية تفاعل موليش تدل على عدم وجود سكريات.
Le but du test est la mise en évidence de la présence de sucres parmi d'autres composés (lipides, protéines, ..). C'est une réaction générale à tous les sucres (oses ou osides).
أساس الاختبار (Principe du test)
En milieu acide concentré et à chaud, les oses se transforment en Furfural (pour les pentoses) et Hydroxyméthylfurfural (pour les hexoses) par cyclisation et déshydratation (voir figure ci-dessous). Ces dérivés ont la propriété de réagir avec les phénols comme alpha-naphtol pour donner des colorations caractéristiques. Dans le cas d'une réaction positive avec l'alpha-naphtol, un anneau rouge violacé apparaît à l'interface acide sulfurique-solution du sucre.
Réactif de Molish (2 g alpha-naphtol + 100 ml Ethanol) طريقة العمل (Mode opératoire)
- Préparer 4 tubes à essai et ajouter 2 ml de sucre 1% (glucose, fructose, saccharose) dans les 3 premiers tubes et 2 ml d'eau distillée dans le dernier tube (témoin).
- Ajouter à chaque tube 2 gouttes de réactif de Molish et agiter les tubes pour mélanger les contenus.
- Couler doucement le long de la paroi de chaque tube 2 ml de H2SO4 concentré.
- Observer et noter la coloration obtenue. La réaction de Molish est positive (présence de sucres) s'il y a apparition d'un anneau rouge-violacé dans l'interface acide sulfurique-solution de sucre (voir photo).
2. Test d'iode pour la détection de l'amidon et du glycogène اختباراليود للكشف عن النشا والكليكوجين
أساس
الاختبار (Principe du test)
تعطي
السكريات العديدة (Polysaccharides) مع اليود معقد ملون. يعطي النشا (Amidon) لوناً أزرقا مع اليود، بينما يتكون لون بني محمر مع الكليكوجين (Glycogène).
Le lugol ou l'eau iodée (I3-) se fixe sur les chaînes polysaccharidiques pour donner des complexes colorés. La réaction du lugol avec le glycogène donne une coloration brune alors qu'on obtient une coloration bleue-noir avec l'amidon.
L'hydrolyse enzymatique de l'amidon en unités de maltose et glucose se produisant dans le système digestif, peut être évaluée par la disparition progressive de la couleur bleue due à l'amidon
non hydrolysé (TP au lycée sur les aliments et nutriments ). Les aliments dont l'amidon est riche en amylopectine, sont rapidement hydrolysés
par les amylases et donnent un index
glycémique élevé!
المواد (Matériaux) -
Lugol ou solution d'iode (mélanger 1g d'iode avec 2 g d'Iodure de potassium dans 100 ml d'eau).
- Sucres: Solutions de sucre à 1% dans l'eau correspondant au glucose, amidon et glycogène.
- HCl 1N
طريقة العمل (Mode opératoire)
- Préparer 4 tubes à essai et y mettre 2 ml d'une solution de sucre à 1% correspondant au glucose (tube 1), amidon (tube 2), glycogène (tube 3).
- Mettre 2 ml d'eau distillée dans le quatrième tube.
- Ajouter 1 ml d'HCl 1N à chaque tube.
- Ajouter 1 à 2 gouttes du lugol dilué.
- Observer et noter les colorations obtenues. Réaction positive: l'amidon (polysaccharide) donne une
couleur bleue. Le glycogène (polysaccharide) présente une couleur brun-rouge.
3. Test à la liqueur de Fehling pour la détection des ucres réducteurs اختبار
فيهلينغ للكشف عن السكريات المختزلة
Principe du test أساس الاختبار
في وسط قاعدي و مع التسخين، تتأكسد السكريات الأحادية (و السكريات العديدة، في بعض الحالات) و تقوم في نفس الوقت باختزال عناصر كيميائية أخرى. تعود هذه الخاصية لوجود وظيفة هيمي
أسيتال حرة، يحملها السكر. تعطي السكريات المختزلة (أو المرجعة) مع كاشف فيهلينغ راسب أحمر آجري من أكسيد النحاسي.
En milieu alcalin et à chaud, les oses et dans certaines conditions les polyholosides peuvent s'oxyder et en même temps réduire
des substances telles que les sels métalliques. On parle alors de pouvoir réducteur des sucres. Cette propriété, qui est due à la présence de fonction hémi-acétalique libre. Celle ci peut être mise en évidence grâce au réactif de Fehling qui est une solution alcaline d'ions cuivreux de coloration bleue (les ions Cu+2 sont maintenus en solution grâce au double tartrate de Na+ et K+).
Si la réaction est positive, on obtient un précipité rouge brique dont la quantité est proportionnelle à celle du sucre réducteur présent.
المواد
(Matériaux)
- Liqueur de Fehling : La liqueur de Fehling est obtenu en mélangeant volume à volume, deux solutions A et B dont la composition est la suivante :
- Solution A : 35 g CuSO4.5H2O + 5
ml H2SO4 concentré + H2O (compléter à 1L).
- Solution B: 150 g tartrate de K et Na + 300 ml NaOH 10% + H2O, compléter à 1000 ml
- Sucres: Solutions de Glucose, fructose, ribose, saccharose et maltose, toutes à 1%
طريقة
العمل (Mode opératoire)
-
Préparer 6 tubes à essai mettez dans chaque tube 1 ml de la solution A puis 1 ml de la solution B. (A+B forment la liqueur de Fehling).
- Ajoutez 2 ml de chaque solution de sucre correspondant au glucose (tube 1), ribose (tube 2), fructose (tube 3), saccharose (tube 4) et maltose (tube 5). Ajouter au sixième 2 ml d'eau distillée.
- Agiter pour bien mélanger le contenu des tubes
- Porter les tubes à ébullition pendant 3 min
- Observer et noter le résultat obtenu. Réaction positive: Apparition d'un précipité rouge brique dont la quantité est proportionnelle à celle du sucre réducteur présent.
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4. Test de Barfoed pour la détection des monosaccharides et disaccharides réducteurs اختبار بارفود للتمييز بين السكريات الأحادية والسكريات الثنائية المختزلة
أساس الاختبار (Principe du test)
يطبق اختبار بارفود للتمييز بين السكريات الأحادية والسكريات الثنائية, وذلك من خلال سرعة تشكل راسب أحمر آجري (أكسيد النحاسي), حيث تعطي السكريات الأحادية هذا الاختبار خلال 5 دقائق، في حين تحتاج السكريات الثنائية إلى 7-12 دقيقة. تتغير كمية الراسب الأحمر تناسبيا مع كمية السكر
المختزل,
Le test de Barfoed est utilsé pour distinguer les monosaccharides des disaccharides parmi des sucres réducteurs. En présence d'un sucre réducteur et à chaud, il y'a formation d'oxyde cuivreux rouge brique insoluble. La réaction est plus rapide quand le sucre réducteur est un ose (5 minutes de chauffage). Elle est
plus lente lorsqu'il s'agit d'un disaccharide réducteur (7-12 minutes de chauffage). En effet, par hydrolyse en milieu acide, les oligosaccharides libèrent des unités monosaccharides et finissent par donner un résultat positif, mais après un temps supérieur à 5 min. Si la réaction est positive, on obtient un précipité
rouge brique dont la quantité est proportionnelle a celle du sucre réducteur présent. المواد (Matériaux)
- Réactif de Barfoed: 13,3 g d'acétate de cuivre dans 200 ml d'eau distillée et 8 ml d'acide acétique glacial (coloration bleue).
-Sucres: Solutions à 1% (dans l'eau) de Glucose, maltose et saccharose طريقة العمل (Mode opératoire)
Préparer 4 tubes à essai et y mettre 1 ml de réactif de Barfoed.
- Ajoutez aux tubes les solutions de sucres correspondant au glucose (tube 1), maltose (tube 2) et saccharose (tube 3). Ajouter 2 ml d'eau distillée dans le quatrième tube. Agiter les tubes pour bien mélanger leurs contenus.
- Porter les tubes à ébullition et noter le temps de chauffage. Arrêter de chauffer les tubes ayant montré un précipité rouge brique. Continuer à chaffer les autres tubes. Réaction positive: pour les oses (monosaccharides) réducteurs, il y a apparition d'un précipité rouge brique après chaffage pendant 5
minutes. Pour les disccharides réducteurs, le temps de chauffage nécessaire est 7-12 minutes.
5. Test de Seliwanoff pour détecter les cétoses إختبار سيليفانوف للكشف عن السكريات الكيتونية
الغرض من الاختبار (But du test)
التمييز بين السكريات الأحادية الالدهيدية (مثل الجلوكوز) والسكريات الأحادية الكيتونية (مثل الفروكتوز) أو على السكريات التي تعطي سكريات كيتونية بالتحلل المائي مثل السكروز. يعطي الاختبار لونا مميزا بالنسبة للسكريات الكيتونية (أحمر كرزي).
Le but du test de Seliwanoff est la distinction entre les cétoses (comme le fructose) et les aldoses (comme le glucose), y compris les glucides contenant donnant des cétoses par hydrolyse. Le test de Seliwanoff donne une coloration caractéristique des cétoses (rouge cerise).
أساس الاختبار (Principe du test):
تختلف السكريات الكيتونية عن السكريات الالدهيدية في أنها تفقد الماء بسرعة أكبر وتكون فورفورال بسهولة أكثر. ويتكثف الفورفورال مع الريزوسينول ليتكون معقد أحمراللون (أحمر كرزي ، rouge cerise)
En présence d'acide chlorhydrique concentré et à chaud les cétoses se déshydratent rapidement pour donner le 5-hydroxyméthylfurfural qui se condense avec le résorcinol pour former un composé rouge cerise.
المواد
(Matériaux)
- Réactif de sellivanoff: 2 g résorcinol + 33 ml HCl concentré + 100 ml H2O. - Sucres: Solutions à 1% (dans l'eau) de Fructose, mannose et saccharose.
طريقة العمل (Mode opératoire):
- Préparer 4 tubes et y déposer 2 ml de solution de sucre à 1% correspondant fructose (tube 1), mannose (tube 2), saccharose (tube 3). Mettre 2 ml d'eau distillée dans un quatrième tube (tube 4, témoin).
- Ajouter à chaque tube 2 ml du réactif de Seliwanoff Ajouter à chaque tube 1 ml d'HCl concentré
- Chauffer les tubes pendant 5 min au bain-marie bouillant et laisser refroidir. Observer et noter les colorations obtenues. Réaction positive: apparition d'une couleur rouge cerise chez les cétoses.
6. Test de Bial pour la détection des pentoses اختبار بيال للكشف عن السكريات الخماسية
أساس الاختبار (Principe du test)
تعطي السكريات الخماسية مع كاشف بيال لوناً
أخضر مزرق، في حين تعطي السكريات السداسية مع كاشف بيال لوناً بنياً مصفراً.
Cette réaction est spécifique des pentoses. En milieu HCl concentré et en présence d'ions Fe+3, les pentoses se condensent avec l'orcinol pour former un composé de coloration verte.
المواد (Matériaux)
-
Réactif de Bial (0,2 g d'orcinol + 100 ml HCl concentré + 5 gouttes FeCl3 à 10%
- Sucres: 2 solutions à 1% dans l'eau de glucose et de ribose. طريقة العمل (Mode opératoire)
- Préparer 3 tubes à essai: mettez dans chaque tube 1 ml de réactif de Bial (sous hotte).
- Ajouter dans les tubes 1 ml de la solution de sucre correspondant au glucose (tube 1) et ribose (tube
2). Dans un troisième tube, ajouter 1 ml d'eau distillée.
- Porter les tubes à ébullition et noter la coloration de chaque tube
- Réaction est positive: apparition d'une couleur verte bleutée (Vert bouteille) pour les pentoses. Dans le des hexose, la couleur est brune jaunâtre.
