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Electrophorèse (كهرتهجير). Aspect théorique


L'électrophorèse est une technique d'analyse et de séparation basée sur les critères de la charge électrique et la taille des molécules. La migration différentielle de particules chargées électriquement, se fait sous l'influence d'un champs électrique.

Seules les particules chargées positivement ou négativement sont attirées par les pôles opposés du champs électrique. Les composés qui peuvent être transformés en particules chargées par formation de complexes, sont de même sujets à une migration sous l'effet du champs électrique. Parmi les supports utilisés dans la technique d'électrophorèse, on note le gel de polyacrylamide donnant de bonnes résolutions lors de la séparation.

électrophorèse (technique). Aspects théorique et pratique


Déplacement électrophorétique

Sous l'action d'un champs électrique, E, une protéine se déplace avec une vitesse, v, proportionnelle au champs:

v = µ E, avec µ  appelée 'mobilité électrophorétique' µ = v / E   (1)  avec : µ en cm2.s-1.volt-1, v en cm.s-1 et E en volt.cm-1
Le champs électrique (E) crée entre 2 électrodes, exerce une force, F, sur une protéine que l'on suppose sphérique et de charge q; F = q E

Les forces de frottement, F', dues à la viscosité (eta) vont s'opposer à la migration de la protéine et la freiner;

Donc, la mobilité d'une particule migrant dans un champs uniforme dépend de 3 facteurs : q, (eta) et r.


---> VOIR DEMONSTRATION


*Elle est proportionnelle à sa charge (q).
*Elle est inversement proportionnelle au coefficient de viscosité du milieu , (eta)
*Elle est inversement proportionnelle à son rayon (r).

La réalisation de l'électrophorèse nécessite 3 composantes principales: 1/ Cuve d'électrophorèse qui porte le support de migration, 2/ Générateur de courant électrique continu et une cuve de révélation des produits séparés.


Types d'éléctrophorèse selon le sens de migration

- Electrophorèse horizontale
- Electrophorèse verticale


SOPPORT DE MIGRATION وسط العزل


Les supports utilisés en électrophorèse sont nombreux, avec des degrés de résolution variables. Leurs types ont permis de distinguer plusieurs appellations en électrophorèse, comme

composantes de la séparation électrophorétique

: - Electrophorèse en veine liquide- Electrophorèse sur papier- Electrophorèse sur gels (agarose, amidon, polyacrylamide...).

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