TECHNIQUES DE SEPARATION ET D'ANALYSE EN BIOCHIMIE

1. TECHNIQUES DE SEPARATION SELON LES CRITERES DES MOLECULES

Les méthodes de séparation en Biochimie exploitent les propriétés physico-chimiques des molécules. L'Electrophorèse fait appel essentiellement au caractère de l'ionicité des molécules qui est derrière l'apparition de charges électrique. La taille des molécules interfère avec la charge dans le processus de séparation.

Les propriétés suivantes sont utilisées pour définir les différents types de téchniques de séparation:

TECHNIQUES PAR VIDEO

- LIEN: Electrophorèse. Théorie et pratique

3. ELECTROPHORESE DES ISOENZYMES

Liens:
- Isoenzymes 1
- Isoenzymes 2
- Isoenzymes 3
- Isoenzymes 4

4. ELECTROPHORESE DES ACIDES NUCLEIQUES

liens: - RFLP - RAPD (1) - RAPD (2) - AFLP

5. TRAVAUX PRATIQUES

Liens: - TP

6. TRAVAUX DIRIGES

Lien: TD

7. TESTS

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3. TECHNIQUES DE CHROMATOGRAPHIE

Le terme 'chromatographie' ('chromatography', en anglais) vient du Grec 'Khrôma' = couleur et 'Graphein' = écrire) implique une serie de techniques reliées par un principe commun: la migration différentielle des substances à séparer à travers une phase solide poreuse (phase fixe), sous l'impulsion d'un fluides vecteur (phase mobile). Plusieurs variantes de cette technique peuvent se présenter. Elles reposent toutes sur 3 grands principes:

1/ Principe d'adsorption. La phase fixe joue le rôle principal: CHROMATOGRAPHIE D'ADSORPTION

2/ Principe de partage. Les 2 phases (Fixe et mobile) sont impliquées. La phase fixe est constituée d'une matière: CHROMATOGRAPHIE DE PARTAGE

2.1. Faite de sa propre structure: CHROMATOGRAPHIE SUR PAPIER
2.2. Déposée sur une plaque: CHROMATOGRAPHIE SUR COUCHE MINCE
2.3. Contenue dans une colonne: CHROMATOGRAPHIE SUR COLONNE

3/ Principe d'échange. La phase fixe présente une forme de réactivité avec les substances à séparer.
3.1. CHROMATOGRAPHIE D'ECHANGE D'IONS
3.2. CHROMATOGRAPHIE D'EXCLUSION
3.3. CHROMATOGRAPHIE D'AFFINITE.
Le vecteur est sous forme liquide: CHROMATOGRAPHIE EN PHASE LIQUIDE
Le vecteur est sous forme gazeuse: CHROMATOGRAPHIE EN PHASEGAZEUSE